notícias da empresa sobre Da síntese à purificação: pontos-chave para o controlo da qualidade no processo de produção do tampão HEPES

No campo da bioquímica e da biologia molecular, o amortecedor HEPES (4- ((2-hidroxietil)-1-ácido piperazineetanosulfónico) é amplamente utilizado em culturas celulares, pesquisa de proteínas,kits de diagnóstico bioquímico e outros cenários devido à sua boa capacidade de amortecimentoA garantia da qualidade do tampão HEPES é crucial para a precisão das experiências de investigação científica relacionadas e a estabilidade dos produtos biológicos..Tudo isto começa com um rigoroso controlo de qualidade no seu processo de produção, desde a síntese até à purificação, que será analisado em pormenor a seguir.

1O processo de síntese e correlação de qualidade do tampão HEPES
Síntese com hidroxietilpiperazina e cloroetanosulfonato de sódio como matérias-primas: Neste método,A hidroxietilpiperazina e o cloroetanosulfonato de sódio são submetidos a uma reação de substituição em condições de reação adequadasNeste processo, a temperatura de reacção, o tempo de reacção e a proporção molar das matérias-primas são factores-chave que afectam o processo de reacção e a pureza do produto.pode desencadear reacções adversas, geram impurezas e reduzem a pureza do HEPES; se o tempo de reação for muito curto, a reação é incompleta e o rendimento é reduzido.
Rota de síntese do isetionato de sódio e da etilipiperazina: esta rota de síntese envolve várias etapas.e depois condensado com etilipiperazinaNa fase de activação, a selecção e a dosagem do activador afectam a actividade do isetionato de sódio e, em seguida, afectam o efeito da reacção de condensação subsequente.Durante a reação de condensação, o pH do sistema de reação desempenha um papel importante na taxa de reação e na estrutura do produto.É necessário um regulador ácido-base para estabilizar o valor do pH do sistema de reação num intervalo de pH adequado.

2Efeito do processo de purificação na qualidade do tampão HEPES

1Método de cristalização: A cristalização é efectuada utilizando a diferença de solubilidade do HEPES em diferentes solventes e a diferentes temperaturas.O produto bruto sintetizado é dissolvido num solvente adequado, e o HEPES é gradualmente cristalizado e precipitado por arrefecimento lento ou evaporação do solvente, enquanto as impurezas permanecem no líquido-mãe.Este método tem requisitos extremamente elevados para o controlo da temperaturaAs alterações de temperatura demasiado rápidas podem conduzir a uma velocidade de cristalização desigual, afetando a pureza e a morfologia das partículas dos cristais.

2- Cromatografia de troca de íons: a separação é obtida com base nas diferentes capacidades de adsorção e dessorção do HEPES e das impurezas nas resinas de troca de íons.Quando uma solução mista contendo HEPES e impurezas passa através de uma coluna de resina de intercâmbio iónico, o HEPES e as impurezas irão trocar e adsorver-se com os íons na resina em graus variados.O HEPES pode ser elutado seletivamente para atingir o objectivo da purificaçãoNo entanto, este método requer um controlo preciso de parâmetros como a taxa de fluxo e a concentração do eluente, caso contrário a separação do HEPES e das impurezas pode não ser completa.

3- Inspecção e controlo da qualidade durante a produção

(I) Inspecção dos principais indicadores de qualidade

1. Inspecção de pureza: a cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) é um método comum para detectar a pureza do HEPES.O HEPES e as impurezas são separados de acordo com os seus diferentes tempos de retenção na coluna cromatográfica, e, em seguida, o conteúdo de cada componente é detectado pelo detector, de modo a calcular com precisão a pureza do HEPES.

2. detecção de pH: o valor de pH do tampão HEPES está directamente relacionado com o seu desempenho de tampão.Usar um medidor de pH de precisão para medir o valor de pH da solução HEPES em condições especificadas para determinar se se encontra dentro do intervalo normalPara produtos HEPES com diferentes utilizações, os valores de pH são ligeiramente diferentes.O HEPES utilizado para cultura celular exige que o valor do pH esteja dentro da faixa de pH aplicável para cultura celular específica para garantir a estabilidade do ambiente de crescimento celular..

3Detecção do teor de impurezas: utilizar espectroscopia de absorção atómica (AAS),Espectrometria de massa de plasma acoplada por indução (ICP-MS) e outras tecnologias para detectar o teor de impurezas de metais pesados (tais como chumbo), mercúrio, cádmio, etc.); utilizar turbidimetria ou cromatografia iónica para detectar o teor de impurezas aniónicas, tais como sulfato.Controlar estritamente o teor de impurezas pode impedir que elas interferam em experimentos ou processos de produção subsequentes..