Em campos experimentais como a bioquímica e a biologia molecular, os tampões são reagentes-chave para manter a estabilidade do pH do sistema.como tampão não iónico comumente utilizado, é amplamente utilizado em cenários experimentais como cultura celular, reações enzimáticas e extração de ácido nucleico devido à sua estabilidade em uma ampla faixa de pH.A estabilidade do tampão PIPES é facilmente afectada pelas condições de temperatura e de armazenagem.Se for utilizado ou armazenado de forma inadequada, a sua capacidade de amortecimento pode diminuir.
1Efeito da temperatura sobre a estabilidade do tampão PIPES
Embora o PIPES seja um tampão de ácido sulfónico com elevada estabilidade, o seu teor de sulfato de potássio é muito baixo.A sua estrutura molecular pode ser submetida a reacções de hidrólise ou oxidação em condições de alta temperatura ou umidade a longo prazoPor exemplo, a alta temperatura acelerará a reação de abertura do anel do anel de piperazina na molécula PIPES,que resulta numa diminuição da concentração do tampão e num enfraquecimento da capacidade do tampãoAlém disso, a alta temperatura pode também promover a interação entre o tampão e outros componentes do sistema experimental (tais como íons metálicos e proteínas),complexos de formação ou precipitação, afetando ainda mais a sua estabilidade.
2Efeito das condições de armazenagem na estabilidade do tampão PIPES
1Selecção do recipiente de armazenamento: o material do recipiente de armazenamento está estreitamente relacionado com a estabilidade do tampão PIPES.A solução PIPES deve evitar o uso de recipientes metálicos (tais como ferro e cobre) para evitar que os íons metálicos se dissolvam e reagem com o tampãoRecomenda-se a utilização de recipientes de plástico de alta qualidade, que são quimicamente inertes e não são fáceis de interagir com os tubos.
2Efeito da luz e do oxigénio: o tampão PIPES é relativamente insensível à luz, mas a exposição prolongada a luz forte pode acelerar a sua reacção de oxidação.A luz solar directa deve ser evitada durante o armazenamentoAlém disso, embora o oxigénio no ar não reage violentamente com o PIPES diretamente,Pode promover a oxidação lenta do amortecedor em condições de alta temperatura e luz intensa, afectando a sua estabilidade a longo prazo.
3Efeito do tempo de armazenamento: a estabilidade do tampão PIPES diminui gradualmente com o prolongamento do tempo de armazenamento.As moléculas tampão sofrerão uma lenta degradação químicaOs experimentos mostram que, quando o tampão PIPES não aberto é armazenado à temperatura ambiente e longe da luz, a vida útil é geralmente de 1 a 3 anos;após abertura, a vida útil será reduzida devido ao contacto frequente com o ar e com poluentes. experimenters need to regularly perform quality inspections on stored buffers (such as pH determination and buffering capacity verification) to ensure that their performance meets the experimental requirements.
III. Recomendações científicas de utilização e armazenagem dos tampões PIPES
1Controle de temperatura: Para armazenagem a longo prazo, recomenda-se armazenar num armazém a temperatura ambiente, longe da luz, para evitar a congelação e o descongelamento repetidos.
2Gerenciamento dos recipientes: utilizar recipientes especiais para embalar tampões durante a configuração para evitar a mistura com outros reagentes; selar a tempo após cada utilização para reduzir o risco de contaminação.
3- rotulagem e registo: marcar o nome, a concentração, o valor do pH, a data de preparação e a data de validade do tampão no recipiente para facilitar a rastreabilidade e a gestão.
4- realizar regularmente inspecções de qualidade dos tampões PIPES armazenados, incluindo a determinação do pH,Observação da aparência (se é turva ou precipitada) e ensaio da capacidade de amortecimento (como a alteração do pH após a adição de ácido/base forte)Se se verificar que o desempenho está a deteriorar-se, deve ser descartado e re-preparado a tempo.
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