Na investigação em bioquímica e biologia molecular, a escolha do amortecedor não só afeta a precisão dos resultados experimentais,Mas também está diretamente relacionado com a estabilidade e atividade das amostras biológicasOs tampões da série da morfolina se destacam entre muitos tampões devido à sua estrutura e propriedades físicas e químicas.Os MOPS (3-N-morfolinopropanossulfônico) e os MES (4-morfolinoetanosulfônico) são comumente utilizados nesta série.Embora os tampões tenham estruturas semelhantes, apresentam diferenças significativas nas características de aplicação e no âmbito de aplicação.Vamos falar em profundidade sobre as diferenças entre MOPS e MES, bem como as suas aplicações nos respectivos domínios.
1- Semelhanças e diferenças na base estrutural e propriedades físicas e químicas de MOPS e MES
1Base estrutural
Ambos os MOPS e MES são tampões zwitteriônicos de morfolina, e suas estruturas centrais contêm um anel de morfolina, que é a fonte da semelhança em suas propriedades físicas e químicas.Há diferenças nas estruturas da cadeia lateral.A cadeia lateral do MOPS é um grupo de ácido propil sulfónico, enquanto a cadeia lateral do MES é um grupo de ácido etílico sulfónico.Diferenças de aspectos.
2Propriedades físicas e químicas
Ambos são pós cristalinos brancos que são facilmente solúveis em água, e ambos fornecem amortecimento ideal dentro de uma faixa de pH específica.9) é mais larga do que a da MES (pH 5.5-6.7), e o seu valor de pKa (7.2) é mais próximo do valor de pH fisiológico (7.4), o que torna o MOPS mais eficaz na simulação de ambientes fisiológicos.O MOPS tem alta transparência à luz UV, que é benéfico para a condução de experimentos de detecção óptica.
2Comparação dos desempenhos de amortecimento dos MOPS e dos MES
1Capacidade de amortecimento
O MOPS tem um bom desempenho em experimentos biológicos que exigem controle preciso do ambiente de pH devido à sua faixa de amortecimento mais ampla e pKa mais próxima do pH fisiológico.Não só pode fornecer um ambiente de pH estável para a cultura celular, eletroforese de proteínas e outras experiências, mas também reduzem os erros experimentais causados por flutuações de pH.O seu estreito intervalo de amortecimento e o seu valor pKa ligeiramente inferior limitam a sua aplicação em determinadas condições específicas.
2Biocompatibilidade
Como amortecimento biológico, a boa biocompatibilidade do MOPS torna-o uma escolha ideal para a preparação de camadas finas de cloroplastos e meios de cultura celular.mas podem ser tóxicos para as células vegetais em altas concentrações (> 10 mM), o que limita em certa medida a sua aplicação em culturas de células vegetais.
3- As respectivas vantagens dos campos de aplicação MOPS e MES
1Aplicação do MOPS
(1) Preparação de camada fina de cloroplastos: o MOPS pode apoiar o processo de transferência de elétrons e fosforilação de cloroplastos e é um amortecedor ideal para pesquisas relacionadas com cloroplastos.
(2) Cultura microbiana: na cultura de Streptomyces faecalis e cefalosporinas, o MOPS proporciona um ambiente estável para o crescimento de microorganismos.
(3) Tecnologia de eletroforese: como componente do sistema eletrolítico da eletroforese de gel bidimensional (IEF), o uso de MOPS ajuda a melhorar a resolução e a precisão da eletroforese.
(4) Biologia molecular: Em experimentos de isolamento de RNA e transferência de membrana, como a hibridização do norte, o MOPS serve como tampão para proteger a integridade e a atividade do RNA.
2Aplicação do MES
(1) Eletróforese de proteínas: no sistema de gel bis-tris, o MES é um tampão ideal para a solução de pequenas proteínas, porque é transparente à luz UV e não forma complexos com íons metálicos.
(2) Culturas celulares: Embora o MES precise controlar a concentração na cultura de células vegetais, é amplamente utilizado em meios tampão para leveduras e células de mamíferos.
(3) Análise cromatográfica: o MES tem um bom desempenho na cromatografia de troca catiônica e em vários experimentos de eletroforese.As suas características de baixa mobilidade iónica e condutividade ajudam a melhorar a sensibilidade da análise.
MOPS e MES são dois tampões de série de morfolina comumente usados, cada um com suas próprias propriedades químicas e campos de aplicação.O MOPS é adequado para uma variedade de experimentos bioquímicos devido ao seu valor de pKa próximo do pH fisiológico e à sua ampla gama de amortecimentoNo entanto, o MES apresenta um bom desempenho em ambientes ácidos e culturas biológicas específicas.e solubilidade do amortecedor devem ser consideradas com base nas necessidades experimentais específicasA selecção e utilização racionais dos tampões MOPS e MES permitem otimizar as condições experimentais e melhorar a fiabilidade dos resultados experimentais.
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